国产激情久久久久99蜜殿,校花玉腿缠腰娇喘迎合,日本va高清不卡视频在线,欧美伊香蕉久久综合类网站

歡迎來(lái)上海昊擴(kuò)科學(xué)器材有限公司!我們將為您提供周到的服務(wù)!
產(chǎn)品分類(lèi)

Product classification

技術(shù)文章
首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 動(dòng)態(tài)高速濕轉(zhuǎn)儀操作流程

動(dòng)態(tài)高速濕轉(zhuǎn)儀操作流程

發(fā)布日期:2025-04-24      瀏覽次數(shù):634
  動(dòng)態(tài)高速濕轉(zhuǎn)儀是Western Blot實(shí)驗(yàn)中實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)從凝膠高效轉(zhuǎn)印到膜上的關(guān)鍵設(shè)備,其操作流程直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。以下為標(biāo)準(zhǔn)化操作步驟:
 
  一、設(shè)備安裝與調(diào)試
 
  設(shè)備檢查
 
  確認(rèn)儀器外觀無(wú)損壞,電源線(xiàn)、轉(zhuǎn)膜夾、海綿墊、濾紙等配件齊全。
 
  檢查轉(zhuǎn)膜槽密封性,確保無(wú)漏液風(fēng)險(xiǎn)。
 
  安裝位置
 
  將儀器放置于平穩(wěn)操作臺(tái),遠(yuǎn)離熱源和振動(dòng)源。
 
  確保通風(fēng)良好,避免設(shè)備過(guò)熱。
 
  電氣連接
 
  連接電源線(xiàn),檢查電壓是否符合設(shè)備要求(通常為220V)。
 
  開(kāi)啟電源,觀察儀器自檢是否正常。
 
  參數(shù)預(yù)設(shè)
 
  根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求設(shè)置轉(zhuǎn)膜參數(shù)(如電壓、電流、時(shí)間)。
 
  推薦參數(shù):
 
  電壓:100-250V(根據(jù)凝膠厚度調(diào)整)
 
  時(shí)間:10-15分鐘(動(dòng)態(tài)高速濕轉(zhuǎn)儀可縮短至傳統(tǒng)時(shí)間的1/5)
 
  溫度:4℃(需預(yù)冷轉(zhuǎn)膜液)
 
  二、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
 
  凝膠制備
 
  完成SDS-PAGE電泳,取出凝膠并切除濃縮膠。
 
  將分離膠浸入轉(zhuǎn)膜液中平衡5-10分鐘。
 
  膜處理
 
  根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇PVDF膜或NC膜。
 
  PVDF膜需用甲醇激活15秒,再浸入轉(zhuǎn)膜液中平衡。
 
  濾紙與海綿準(zhǔn)備
 
  裁剪與凝膠大小匹配的濾紙(6.5×10cm)和海綿墊。
 
  將濾紙和海綿浸入轉(zhuǎn)膜液中充分潤(rùn)濕。
 
  三、轉(zhuǎn)膜操作
 
  組裝“三明治”結(jié)構(gòu)
 
  陰極(黑色面):海綿墊 → 濾紙 → 凝膠 → 膜 → 濾紙 → 海綿墊
 
  陽(yáng)極(紅色面):覆蓋后閉合轉(zhuǎn)膜夾,確保無(wú)氣泡。
 
  安裝轉(zhuǎn)膜夾
 
  將轉(zhuǎn)膜夾插入轉(zhuǎn)膜槽,黑色面對(duì)黑色電極,紅色面對(duì)紅色電極。
 
  加入預(yù)冷轉(zhuǎn)膜液至標(biāo)記線(xiàn),避免液面過(guò)高導(dǎo)致短路。
 
  啟動(dòng)轉(zhuǎn)膜
 
  蓋上轉(zhuǎn)膜槽蓋子,連接冰盒或循環(huán)水冷裝置。
 
  按下啟動(dòng)按鈕,開(kāi)始轉(zhuǎn)膜。
 
  四、實(shí)驗(yàn)優(yōu)化與注意事項(xiàng)
 
  溫度控制
 
  轉(zhuǎn)膜過(guò)程中持續(xù)冰浴,防止溫度過(guò)高導(dǎo)致蛋白質(zhì)降解。
 
  動(dòng)態(tài)高速濕轉(zhuǎn)儀通過(guò)內(nèi)置冷卻系統(tǒng)或外接冰盒維持低溫。
 
  氣泡排除
 
  用玻璃棒或滾輪輕輕趕走凝膠與膜之間的氣泡。
 
  氣泡會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)膜不均勻,影響結(jié)果。
 
  參數(shù)調(diào)整
 
  凝膠厚度:0.75mm凝膠用100V,1.5mm凝膠用150V。
 
  轉(zhuǎn)膜時(shí)間:根據(jù)目標(biāo)蛋白分子量調(diào)整(如小分子蛋白可縮短至7分鐘)。
 
  電流監(jiān)測(cè)
 
  動(dòng)態(tài)高速濕轉(zhuǎn)儀通過(guò)實(shí)時(shí)電流反饋優(yōu)化轉(zhuǎn)膜效率。
 
  若電流異常(如過(guò)高或過(guò)低),需檢查電路或轉(zhuǎn)膜夾連接。
 
  五、轉(zhuǎn)膜后處理
 
  膜的取出
 
  轉(zhuǎn)膜結(jié)束后,打開(kāi)轉(zhuǎn)膜夾,將膜浸入麗春紅S染液中染色5分鐘。
 
  根據(jù)條帶清晰度判斷轉(zhuǎn)膜效果。
 
  封閉與孵育
 
  將膜浸入5%脫脂牛奶中封閉2小時(shí)。
 
  一抗孵育(4℃過(guò)夜)→ 二抗孵育(室溫1小時(shí))。
 
  顯影
 
  使用ECL發(fā)光液顯影,通過(guò)化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)采集圖像。
 
  六、設(shè)備維護(hù)與故障排除
 
  日常維護(hù)
 
  每次使用后清潔轉(zhuǎn)膜槽,避免鹽結(jié)晶。
 
  定期檢查電極和密封圈,更換老化部件。
 
  常見(jiàn)故障
 
  漏液:檢查密封圈是否損壞或轉(zhuǎn)膜夾是否閉合緊密。
 
  電流異常:檢查電源線(xiàn)、電極連接及轉(zhuǎn)膜液導(dǎo)電性。
 
  轉(zhuǎn)膜不均:重新檢查“三明治”結(jié)構(gòu)組裝和氣泡排除。
 
  總結(jié)
 
  動(dòng)態(tài)高速濕轉(zhuǎn)儀通過(guò)優(yōu)化轉(zhuǎn)膜參數(shù)和溫度控制,顯著縮短轉(zhuǎn)膜時(shí)間并提高效率。嚴(yán)格遵循標(biāo)準(zhǔn)化操作流程,結(jié)合實(shí)驗(yàn)優(yōu)化技巧,可確保Western Blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和重復(fù)性。

Copyright © 2025 版權(quán)所有:上海昊擴(kuò)科學(xué)器材有限公司  ICP備案號(hào):滬ICP備20016915號(hào)-1  管理登陸  技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)   總流量:210112  網(wǎng)站地圖

在線(xiàn)客服 聯(lián)系方式

服務(wù)熱線(xiàn)

86-021-52261560

欧美真人真做视频在线观看| 成人电影在线播放| 日韩精品成人va在线观看| 色婷婷香蕉在线一区二区| 欧美一区日本一区二区电影| 衣服被扒开强摸双乳18禁网站| 国产91久久一区二区三区| 最新国产日韩欧美中文在线| 国产精品你懂得在线观看| 欧美日韩国产成人高清视频| 欧美一区二区激情男与男| 啊灬用力灬啊灬啊灬啊灬a片男男 国内精品久久久久电影院 | 伊人久久亚洲婷婷综合久久| 一道本免费综合在线视频| 日本精品视频在线一区二区| 少妇高潮呻吟A片免费看| 男人添女人囗交做爰视频| 日本黄国产高清在线观看| 国产AV亚洲精品久久久久| 人妻出轨和黑人疯狂做国产人| 青娱乐极品视觉盛宴精品| 国产精品乱子伦一区二区| 玩弄放荡人妻少妇系列视频| 午夜伦理久久久久久久久| 一区二区三区免费的视频| 亚洲欧美精品午睡沙发| 久久中文字幕人妻熟av| 九九九九九九九九国产精品| 一区二区三区 三上悠亞| 亚洲国产日韩伦中文字幕| 午夜福利精品短视频在线| 国产亚洲欧美另类一级片| 少妇人妻偷人精品一区二区| 把女人弄爽特黄a大片视频| 无码精品a∨在线观看免费| 在线播放一区二区精品产| 欧美 亚洲 国产 成人| 大鸡吧操我在线视频观看| 樱花草在线观看播放视频| 一起草17c官网在线观看| 久久精品国产亚洲av高清色欲|